As enzimas de restrição- ou Endonucleases- foram primeiramente isoladas de bactérias- E. coli- e são enzimas que agem " Cortando" o DNA em lugares específicos e predetermiados. Cada enzima reconhece e corta uma determinada sequência de nucleotídeos, gerando fragmentos de DNA de tamanhos conhecidos. Dessa forma elas tem um papel fundamental na Engenharia Genética para manipulação do material genético como por exemplo para clonagem, e podendo também ligar fragmentos de DNA. São utilizadas quando pretende-se retirar um determinado fragmento (um gene, por exemplo) para posterior ligação a uma outra molécula de DNA, em particular a um vector de clonagem. As enzimas de restrição, viabilizam a formação de moléculas de DNA recombinado por permitirem criar fragmentos, com a informação genética de interesse.
